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yoyo单眼皮

铁虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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红花: 1
帖子: 103
在线: 37.2小时
虫号: 1663839
注册: 2012-03-04
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 求高人指点 3‘RACE 急急急

3’RACE总是做不出来现在PCR有条带在一千bp处有一条带 700左右有一条带但是都很暗剩下就是200bp有带很亮有拖尾我觉得1000bp可能是目的条带但是胶回收很困难我的程序是94度3min 94度 30s 68度45s 72度 2min 25个循环反应体系是12.2ul水 2ulbuffer 1.6 ul dNTPs 1ul特异引物 1ul模板 2ulUPM引物请问怎么样才能然我那个1000bp条带亮一些啊！！！！真的很着急很上火

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1楼 2013-03-21 09:44:51

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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 0.3
帖子: 46
在线: 19.4小时
虫号: 1547536
注册: 2011-12-22
专业: 病毒学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

你可以改变一下PCR程序，第一个循环把退火设低一点，比如50度，然后每一个程序退火都提高一度，直到你目前的退火为止，随后的循环中退火不变，循环数可以多一些，但是不要超过35。

4楼2013-03-21 18:01:42

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