| 查看: 2940 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
实时荧光定量 相对定量 标准曲线的问题
|
||
|
各位同仁： 我最近做相对定量，首先做标准曲线看内参和目的基因的扩增效率是否一致，在这个环节上一直无法突破。 问题是：我的cDNA以10倍梯度稀释了13个梯度，但是Ct值都很接近，都在19-21之间。我的体系是takela的，20ul mix10 上0.4 下0.4 模板1 水8.2 95° 30s 95°5s 60°30s 40个循环 用的是96孔板，先把mix和上下，水混匀分装后，再加模板。 mix用之前先颠倒混匀。 加样时避免气泡的产生。 我的cDNA是由天根的反转录试剂盒得来的，用5ug的总RNA反转录成50ul的体系。 请各位帮我分析一下原因吧！做了3周了，一直这样无进展，很苦闷！谢谢您的分享和帮助了~ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有77人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
11楼2013-06-04 11:18:16
3楼2013-03-21 13:37:10
4楼2013-03-21 17:09:12
5楼2013-03-21 17:29:48