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fayzhao金虫 (小有名气)
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[求助]
摇菌 不浑浊 已有1人参与
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各位好， 目前我正在做的是构建表达载体，我做的是线虫RNAi。 具体步骤是这样的： 双酶切得到正确的目的基因片段，连接到L4440载体，转化到大肠杆菌HT115中，挑单克隆测序，将阳性克隆菌液保存。 遇到的问题是这样的： 首先说明一下LB培养基没有问题（因为同时摇的还有其他菌，且浑浊）。 测序正确的菌液无法摇浑浊。接着我将菌液涂平板以复壮，但是挑到的单菌落还是无法摇浑浊。接下来我将最初转化时涂的平板拿出来（已在4℃保存一周），挑取上面的单菌落摇菌，仍然不能摇浑。 我实在是找不到原因了，无奈啊，希望知道方法的同道帮帮忙啊，O(∩_∩)O谢谢啦 |
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