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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求问，HPLC出峰很早而且分不开，菜鸟求大神啊
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zhengyc

新虫 (初入文坛)

[求助] 求问，HPLC出峰很早而且分不开，菜鸟求大神啊

流动相是甲醇，水和乙腈，不管怎么梯度洗脱都不行。还是出峰很早而且很集中。流速：1ml/min。
跪求大神解答！

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1楼 2013-03-19 11:10:10
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~ 2013-03-20 08:44:05
zhengyc: 金币+1 2013-04-10 15:14:48
zhengyc: 金币+1 2013-04-10 15:15:59
只是改变色谱柱流动相比例的话，帮助不会很大，因为现在峰展宽已经有点大了，果断要求加离子对缓冲盐，不然没法办
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8楼2013-03-19 14:03:31
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zly86

铁杆木虫 (正式写手)
样品不明的时候，谁都没有那么大的本事跟你说怎么做，至少要知道是酸，碱，盐，中性，含有什么基团，吸收怎样，大分子小分子
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14楼2013-03-20 08:56:01
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普通回帖

ufoking

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhengyc: 金币+1 2013-04-10 15:14:52
不知道你是什么柱子，如果是反相柱的话试试降低下有机相的比例，或者换一根较长的柱子
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2楼2013-03-19 11:21:47
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zhengyc

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ufoking at 2013-03-19 11:21:47
不知道你是什么柱子，如果是反相柱的话试试降低下有机相的比例，或者换一根较长的柱子

我是用的C18反相柱。长柱子能改善很多吗
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3楼2013-03-19 11:24:35
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ufoking

木虫 (小有名气)
★
xbqewpq: 金币+1, 鼓励发帖交流~ 2013-03-20 08:44:21
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhengyc at 2013-03-19 11:24:35
我是用的C18反相柱。长柱子能改善很多吗...

长柱子能延长样品的出峰时间，至于能不能分开目标峰和杂质峰，只有试过了才知道
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4楼2013-03-19 11:30:41
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fever366

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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15cm柱子的话换25cm的，并提高水相比例
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5楼2013-03-19 11:54:18
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~ 2013-03-20 08:44:45
zhengyc: 金币+1 2013-04-10 15:16:09
化学药还是生物分子，就贴张图根本没法分析出真正原因。
求助总的把问题讲清楚吧。
一个液相条件就C18  1.0流速？
想保密就不要求助，真心求助就讲详细点，
你分析的肯定是特殊样品，楼上的方法估计没大用
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6楼2013-03-19 12:00:46
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empore

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~ 2013-03-20 08:45:12
没有足够的条件，不够判定。
样品是盐么？是的话要加缓冲液。

如楼上所说，想保密就不要求助了，样品类型啥的也需要提供三
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如是我闻
7楼2013-03-19 12:07:29
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头头

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~ 2013-03-20 08:45:25
同意楼上的  缓冲盐水相的作用就体现在这里了 不然干嘛大家不都用水呀 配缓冲盐流动相很麻烦哦
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…spendmoretimewithyourfamilyandfriends……eatyourfavoritefoods……visittheplacesyoulove…
9楼2013-03-19 19:30:33
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蒋海龙

金虫 (小有名气)

loong

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我没做过液相色谱。但是，如果试了很多方法没分开，就换柱子吧
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10楼2013-03-19 21:19:54
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