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ligangpku金虫 (小有名气)
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[求助]
PCR后双链在变性胶上打不开
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大家好： 我最近在做一个PCR实验，引物都是自己合成的，模板链为36个碱基。但是PCR后做乙醇沉淀再走胶后，发现产物条带总是比标准的模板链高出大约10个碱基的位置，我尝试了8对引物组合，仍然如此。 因此，我怀疑是互补数太多，在变性胶上依然没有打开，请问大家可有类似的经历，是否有相应的解决方案。 ps：本人已经做过酶切实验，发现可以切断，酶切以后的条带是对的。准备定一对互补的引物，看一下位置。DNA测序估计不太可行。只是，实在不太明白为什么变性胶打不开…………，谢谢各位。 |
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