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关于荧光物质激发波长的问题
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我在做细胞内活性氧的测定,用的是2 ,7 -dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA)做染色剂,按照文献的步骤对细胞进行处理后用荧光分光光度计测量.我看的文献用的是蔡司的荧光显微镜,其发射波长是520,激发是485,其他文献也差不多都是这个值,可是我用我们实验室的荧光分光光度计扫出来的激发是260,发射是520. 我已经重复过实验了,而且样品处理应该是不会有问题的,我每次自己扫出来的都一样,那为什么会差这么多呢?这是不是说明我的前处理一定有问题,还是存在这样的现象? |
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