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组织样本酶活性高，酶基因RT-PCR后表达水平低
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各位虫友赐教啊！ 本人最近做了RT-PCR。出现些问题。大致如下： 1.测定组织样本中几种酶的活性，结果活性高。 2. 做了这几个酶对应基因的RT-PCR，结果三个酶基因蛋白表达量并无显著差异。 请问，最后讨论的时候应该从那方面入手呢，要怎么讨论？ 本人外行，对分子生物只是略懂皮毛，知道酶活性高，但最终对应的蛋白表达不一定高，那是什么影响了它的表达呢，是在表达的过程中修饰了，还是别的什么？谢谢！ 在线等！！！  |
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- 着急！RT-PCR扩增效率低，情况很诡异，求助高手帮忙指点
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- 酶基因表达量高，酶活性就一定高吗？（请大家帮帮忙，谢谢）
已经有12人回复
盼盼跳
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4楼2013-03-11 19:45:24
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3楼2013-03-08 14:02:01
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我是做运动损伤的，这两种酶是生物体内内源性抗氧化防御系统中的主要酶（还有一种是GSH-Px），它们与自由基之间处于一种动态平衡，当机体剧烈运动或者处于应激状态时，机体氧化磷酸化作用增强，从而产生足够的能量维持机体的需要，但同时也导致了自由基的产生增多，zhe 将导致脂质出现氧化损伤。由于脂质是细胞或者细胞器的生物膜的重要组成成分，因此脂质的氧化损伤可导致细胞或者细胞器的结构损伤和功能障碍。线粒体是细胞进行呼吸链和氧化磷酸化反应的主要场所，因此线粒体既是氧自由基生成的主要场所也是易受自由基攻击的部位。氧自由基不仅会导致肌肉线粒体膜损伤，使呼吸链产生ATP的过程受阻，而且将损伤肌浆网膜使钙离子大量释放到胞浆，使肌肉收缩能力下降。此外，氧自由基还可导致红细胞膜出现结构损伤，使红细胞脆性增大，变形性和流动性下降，出现红细胞溶血。 所以，给药后如果测定的SOD和CAT酶活性升高，则说明它们清除氧自由基的能力增强，即可以解释为药物能减少由自由基带来的氧化损伤，达到延缓疲劳的作用。 自己的一点看法，欢迎交流。 |
5楼2013-03-12 00:40:52
