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slshihao

木虫 (小有名气)

[求助] 总黄酮的含量问题

某种中药的总黄酮部位,用紫外测定的话含量超过50%,现在想知道里面有哪些黄酮累成分,做过质谱,用HPLC检测到里面的黄酮量加起来并没有50%,这是什么原因?会不会是因为做HPLC时有些峰没有跑出来?求大神指导
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ahzhihua

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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slshihao: 金币+10, 有帮助 2013-03-06 20:40:41
首先,您要确定您的样品中是否有其他的成分也有紫外吸收,对总黄酮的测定有干扰,因为紫外吸收有加和性,如果有要除去。其次,不是所有黄酮在同一波长下有最大吸收,建议用DAD检测器做个全波长扫描。希望对你有用。
4楼2013-03-05 12:57:27
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jx2963

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
黄酮类成分种类很多,大都有紫外吸收,不知道楼主是以哪几种成分为对照做的HPLC,是不是对照品没有找全呢?
nowornever!
2楼2013-03-04 22:15:43
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number0991

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
紫外是不准确的。尤其是芦丁对照显色方法。
难道你把所有黄酮都鉴别出来了,做的绝对定量?
3楼2013-03-05 11:46:34
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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slshihao: 金币+90, 有帮助, 10 2013-03-06 20:40:52
用紫外测定总黄酮,应该就是用芦丁作为对照品,但紫外测定的含量可能不太准确,与HPLC上面测定的含量有出入应该是正常的。或者你先在紫外上面做个波长扫描(或者在HPLC上用DAD作全波长扫描,考虑到并非所有的HPLC都买了DAD)看看在什么地方有最强吸收。
5楼2013-03-05 13:45:56
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