| 查看: 1024 | 回复: 1 | ||
[求助]
荧光原位杂交实验求助
|
|
我想做细菌的计数，用荧光原位杂交的方法，可是在荧光显微镜下‘；用40X镜头只看到DAPI紫外下的蓝色，而看不到探针绿光激发出的颜色，是没杂交上吗？基本在绿光下没有东西，诚心求各位研友帮忙解答下。我的实验步骤如下。 1、菌液稀释（大肠杆菌，肠球菌，乳酸菌），4%多聚甲醛固定1h，10000rpm离心5min，去上清，1XPBS重悬。重复两次。 2、玻片铬明胶处理 3、10μ菌液涂匀 4、37℃烘干 5、10xPBS洗两次，一次5min。 6、梯度乙醇脱水 6.1、加10μ 1mg/mL溶菌酶 6.2、37℃孵育15min 6.3、梯度乙醇脱水 7、加10μ蛋白酶K（1mg/mL） 8、37℃孵育半小时 9、梯度乙醇脱水 10、加杂交液，加盖玻片，湿盒中46℃预杂交30min 11、梯度乙醇脱水 12、加探针杂交液（EUB388探针），加盖玻片，46℃杂交过夜 13、预热到48℃洗脱液洗脱20min。然后DAPI染色。 14、荧光显微镜镜检。 |
回复此楼» 猜你喜欢
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有8人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有16人回复
-
澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域
已经有22人回复
-
静等基金结果
已经有21人回复
-
FileCode能看出啥？
已经有28人回复
-
阿姨
已经有3人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有6人回复
-
filecode
已经有16人回复
-
重要来源：本周末出结果
已经有10人回复
-
不应该看fileCode
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光原位杂交图像处理问题
已经有9人回复
- 斑马鱼胚胎整体原位杂交问题求助！
已经有7人回复
- FISH（荧光原位杂交）结果出来了，怎么判断是几号染色体？
已经有12人回复
- 求助——请懂荧光原位杂交的牛人解答一下
已经有4人回复
- 【求助/交流】请问原位杂交一般采用多少温度
已经有13人回复
- 【求助/交流】原位杂交液配制
已经有4人回复
- 【求助/交流】引物合成 及 Primer-BLAST问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】荧光原位杂交
已经有4人回复
- 【求助】FISH实验过程
已经有8人回复
- 【求助】微生物样品采集
已经有5人回复
- 【求助/交流】求：流式高手-使用流式细胞技术的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】荧光原位杂交实验技术
已经有13人回复
2楼2013-06-19 20:58:20
