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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 一直都能PCR出来的产物，怎么重复不出来了
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SaG_W

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得可能是pcr仪出问题了，实验室同样的反应，这台pcr就可以，另外一台就不行。还有就是引物虽然稳定，但还是建议做不出来的时候全部换新的试试，试剂都换了试一下
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11楼2013-04-19 11:17:43
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learningying

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 囧囧俏 at 2013-03-11 09:28:50
怎么没人回复呢？更棘手的问题来了 现在pcr阳性，但酶切总是阴性结果，阴阳对照成立，鉴定的是TA克隆的单克。做了半年了总是有各种问题，快要做死在酶切连接上了，求大神给点建议！！

浓度之比是十分重要的。强调下：这里所说的浓度比是指摩尔浓度之比，一般片段和载体的摩尔浓度之比为6:1的时候基本上一下子就做出来了。（碱基之比就是分子量之比，直接计算摩尔浓度之比。）我也是在这里困了2个月，后来就做出来了。
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加油，天道酬勤
12楼2014-10-27 19:57:33
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