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SaG_W

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得可能是pcr仪出问题了,实验室同样的反应,这台pcr就可以,另外一台就不行。还有就是引物虽然稳定,但还是建议做不出来的时候全部换新的试试,试剂都换了试一下
11楼2013-04-19 11:17:43
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learningying

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 囧囧俏 at 2013-03-11 09:28:50
怎么没人回复呢?更棘手的问题来了 现在pcr阳性,但酶切总是阴性结果,阴阳对照成立,鉴定的是TA克隆的单克。做了半年了总是有各种问题,快要做死在酶切连接上了,求大神给点建议!!

浓度之比是十分重要的。强调下:这里所说的浓度比是指摩尔浓度之比,一般片段和载体的摩尔浓度之比为6:1的时候基本上一下子就做出来了。(碱基之比就是分子量之比,直接计算摩尔浓度之比。)我也是在这里困了2个月,后来就做出来了。
加油,天道酬勤
12楼2014-10-27 19:57:33
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