| 查看: 2477 | 回复: 3 | ||
nuclearfan银虫 (小有名气)
|
[求助]
关于双标的免疫荧光很大困惑！！！
|
|
求高手解答：本人用免疫荧光检测一个复杂细胞类型的组织切片某蛋白的表达，用一个mouse源的抗体标记细胞类型，用另一个Rabbit源的抗体标记这个蛋白。在此之前我已经用DAB的IHC（ABC法）对单独的抗体实验成功，对照同样没有问题，分别的抗体阳性的细胞类型应该是部分重合或根本不重合。免疫荧光的2抗是488标的donkey anti-Mouse和594标的donkey anti-Rabbit（都是Santa的），封闭使用的羊血清不少于3小时，一抗1：100稀释4度过夜，洗涤5X3，二抗1：200 RT 1小时。这几次的结果是通过merge后 完全重合。后来我补充了个实验，只用单一的mouse源一抗和抗mouse的2抗做了个简单的对照（488），分别用绿光 蓝光 黄光激发，发现都能打出相同位置的光，只是颜色不同（普通的电镜不是共聚焦）。 我很困惑，求高手耐心解答！！在线等！！如有不明确的，可以指出，我重新说明 |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有63人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问免疫荧光双标一抗二抗可以同时加入吗
已经有4人回复
2楼2013-02-24 20:29:13
3楼2013-02-24 20:31:03
4楼2017-11-27 21:44:43
