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xjtu0025

新虫 (小有名气)

[求助] 菜鸟求助,关于克隆片段的定位 已有1人参与

老师给的题目是一个基因的部分片段克隆,想以后能纯化出蛋白做抗体。我现在的任务是要找出基因序列,设计引物,克隆,然后放到载体里面就好了。本科毕设。
问题是,那个基因一共转录了15个产物,只有8个protein coding了。只有3个有CCDS区。有CCDS区的那三个重复序列大,氨基酸数相似,围绕的相关研究多。我打算就找前3个重复序列克隆,是否合理呢?
还有一个问题,因为没有酶切位点,是要PCR的时候P上去,就要设计在引物开头。这样是否会对引物的扩增效率造成影响。
前一个做这个的师兄可能因为引物没设计好,到最后都没能PCR成功。


求大神们指点,第一次完全自己做实验,老师也不怎么管,非常迷茫
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zcl1234

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

转录的15个产物里,8个是最后可以翻译成蛋白质的,剩余的7条是假基因,也就是参与转录,但不能翻译为蛋白质。。。我只知道这么多
行胜于言
2楼2015-11-05 10:25:39
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偏执狂123

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

3楼2018-05-18 10:37:07
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