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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菜鸟求助，关于克隆片段的定位
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xjtu0025

新虫 (小有名气)

[求助] 菜鸟求助，关于克隆片段的定位 已有1人参与

老师给的题目是一个基因的部分片段克隆，想以后能纯化出蛋白做抗体。我现在的任务是要找出基因序列，设计引物，克隆，然后放到载体里面就好了。本科毕设。
问题是，那个基因一共转录了15个产物，只有8个protein coding了。只有3个有CCDS区。有CCDS区的那三个重复序列大，氨基酸数相似，围绕的相关研究多。我打算就找前3个重复序列克隆，是否合理呢？
还有一个问题，因为没有酶切位点，是要PCR的时候P上去，就要设计在引物开头。这样是否会对引物的扩增效率造成影响。
前一个做这个的师兄可能因为引物没设计好，到最后都没能PCR成功。


求大神们指点，第一次完全自己做实验，老师也不怎么管，非常迷茫
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1楼 2013-02-21 10:40:33
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zcl1234

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

转录的15个产物里，8个是最后可以翻译成蛋白质的，剩余的7条是假基因，也就是参与转录，但不能翻译为蛋白质。。。我只知道这么多
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行胜于言
2楼2015-11-05 10:25:39
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偏执狂123

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
3楼2018-05-18 10:37:07
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