应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求指点，大家看下这样的带跑的正常吗？
181/2返回列表12下一页
查看: 1154  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

三吉草

铜虫 (小有名气)

[求助] 求指点，大家看下这样的带跑的正常吗？

我要构建一个载体，目的基因1500bp左右，扩完基因后条带位置正确（DL2000，条带在2000和1000中间），可是酶切后，目的片段位置却十分接近2000bp的位置，而且在2000bp之后隐约还有一条杂带，这是怎么回事？按道理把扩下来的基因酶切最多也不会超过1500bp，为什会出现大于2000bp的条带啊？而且目的条带还十分接近2000bp？求指点！

aaa
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-25 18:03:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

henryxue

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
三吉草: 金币+2, ★有帮助 2013-01-27 09:37:19
三吉草: 金币+1 2013-01-27 09:38:08
凝胶的浓度是多大的？0.8%-1%的？我感觉是正常的，因为凝胶的分离并不是一个线性的关系，而且不同凝胶的浓度和电泳的时间都可以影响最终电泳的形态。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

三吉草
2楼2013-01-26 07:56:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
三吉草: 金币+1 2013-01-27 09:37:39
从胶上定大小不是很准确，有时候就是这样。虽然看起来与实际大小有出入。既然你确定开始克隆的片段正确，你可以拿去测序。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

三吉草
3楼2013-01-26 08:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
三吉草: 金币+1, ★有帮助 2013-01-27 09:37:04
上述两个同仁说的很有理，marker只是一个对比的，加上跑胶的原因，一般不能精确的提供大小比对，只是一个参考。要想确切的知道，到底是不是，最好的办法还是测序！
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

三吉草
生物化学与分子生物学
4楼2013-01-26 10:24:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by henryxue at 2013-01-26 07:56:23
凝胶的浓度是多大的？0.8%-1%的？我感觉是正常的，因为凝胶的分离并不是一个线性的关系，而且不同凝胶的浓度和电泳的时间都可以影响最终电泳的形态。

那很亮的那条目的条带之后还有一条模糊的带，那是杂带吗
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-26 11:23:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

henryxue

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xy656691 at 2013-01-26 11:23:32
那很亮的那条目的条带之后还有一条模糊的带，那是杂带吗...

应该是
回复此楼
6楼2013-01-26 14:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WilliamHJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by xy656691 at 2013-01-26 11:23:32
那很亮的那条目的条带之后还有一条模糊的带，那是杂带吗...

可能是你在酶切的时候有什么杂质污染了DNA，如果导致DNA的性状发生变化，电泳跑到后面也说不准的
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

三吉草
学习中
7楼2013-01-26 14:08:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三吉草

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by henryxue at 2013-01-26 07:56:23
凝胶的浓度是多大的？0.8%-1%的？我感觉是正常的，因为凝胶的分离并不是一个线性的关系，而且不同凝胶的浓度和电泳的时间都可以影响最终电泳的形态。

1%的胶，可能我的电泳时间也有点短，至少1000和750bp的带都没有跑开。但是对于那条2000bp之后的杂带很是疑惑，不知怎么回事？不过还是谢谢你！
赞一下 回复此楼
8楼2013-01-26 16:27:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三吉草

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-26 08:17:21
从胶上定大小不是很准确，有时候就是这样。虽然看起来与实际大小有出入。既然你确定开始克隆的片段正确，你可以拿去测序。

是的，谢谢
回复此楼
9楼2013-01-26 16:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三吉草

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by lidonghong at 2013-01-26 10:24:30
上述两个同仁说的很有理，marker只是一个对比的，加上跑胶的原因，一般不能精确的提供大小比对，只是一个参考。要想确切的知道，到底是不是，最好的办法还是测序！

谢谢你，测序只能鉴别那条最亮的带是不是我要的目的条带，但是对杂带的出现很不解，如果说是污染了，两个样出现同样的杂带。。。这概率
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-26 16:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 三吉草 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭