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liurz

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[求助] Xho I 和Not I双酶切后电泳出现严重拖尾

Xho I 和Not I双酶切后电泳出现严重拖尾，如图分别是酶切前后图片。请分析一下原因谢谢。酶切体系为20ul，其中两内切酶各1ul，酶为NEB公司产品。

酶切前.jpg

酶切后.jpg

[ Last edited by liurz on 2013-1-24 at 22:38 ]

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1楼2013-01-24 22:35:16

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liurz: 回帖置顶 2013-01-25 14:16:17

抱歉，补充一下，酶切体是50ul，昨天写错了。
酶切体系50ul，Xho I 和Not I各1ul（可以酶切2ug DNA），NEBbuffer 3加了5ul，纯化后目的基因30ul（三PCR管一起纯化得到），100×BSA 0.5ul，剩余无菌水补足50ul。37℃水浴4小时。或许有目的基因量太大的缘故，但是第一次实验同样体系DNA量很少，也有拖尾现象。两幅图分别是酶切前后电泳图。
另外，本人实验室无DNA浓度测定仪，都是估计的，请各位帮助估计下我的DNA浓度吧
酶切前最亮的带为100ng，请问我的DNA是不是700ng左右呢？