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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白保存 冻融后沉淀
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nsfzlc

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白保存 冻融后沉淀

我的蛋白在经过Ni柱纯化后，超滤浓缩后，直接放在-20保存，后来再取出过分子筛时，放在冰上，或者室温解冻，都会有不少沉淀析出？是蛋白变性了吧？该怎么避免呢？总不能每次纯化都不睡觉连续作业吧。。。
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1楼 2013-01-21 14:36:19
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

百分百的咪唑的问题，估计是超滤除咪唑不彻底，建议彻底超滤除掉咪唑，或者透析。我以前也出现过这个问题，彻底去除咪唑，加上5%的甘油，先液氮速冻，后来就没事了。
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12楼2013-02-01 14:18:19
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果只是过夜的话放在4°C。长时间液氮冻后放-80°C。你的样品里加了甘油吗？
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2楼2013-01-21 15:55:26
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-22 12:04:59
本帖仅楼主可见
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3楼2013-01-22 05:46:32
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
液氮冻后放-80°C应该问题不大了。
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蓝精灵
4楼2013-01-22 08:22:19
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