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ben7737873

铁虫 (初入文坛)

[求助] 请问同义突变对后续蛋白表达有影响吗?可以继续实验吗?

本人前阶段构建了一个表达载体,昨天测序结果发现其中一个密码子CGC测序结果为CGT,一个碱基发生了突变,但是氨基酸没有改变,还是精氨酸,是同义突变,请问这种情况是需要重新构建呢?还是完全没问题,直接可以继续表达蛋白,请有经验的指教一下,谢谢!
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
查一下你要做表达的宿主的密码使用偏好。如果该密码子对你要用的表达宿主不是稀有密码子的话就没什么问题。如果突变成稀有密码子了蛋白的表达量可能上不去。
3楼2013-01-18 08:09:04
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yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人感觉没什么问题,精氨酸有六种编码的同义密码子,虽然不同物种对不同密码子有偏好性,某种密码子(如CGC)使用的频率高一些,但其它密码子在同一物种中也同样存在着,不会影响其表达。
2楼2013-01-17 16:06:08
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ben7737873

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-18 08:09:04
查一下你要做表达的宿主的密码使用偏好。如果该密码子对你要用的表达宿主不是稀有密码子的话就没什么问题。如果突变成稀有密码子了蛋白的表达量可能上不去。

请问后续我表达是用bl21(DE3),这个宿主,对CGT是稀有的吗?谢谢。
4楼2013-01-18 08:50:17
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


ben7737873: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 谢谢! 2013-01-18 14:39:23
引用回帖:
4楼: Originally posted by ben7737873 at 2013-01-18 08:50:17
请问后续我表达是用bl21(DE3),这个宿主,对CGT是稀有的吗?谢谢。...

不是的,你可以放心继续实验。
5楼2013-01-18 09:36:33
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