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huangrui5036金虫 (小有名气)
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里氏木霉在10L发酵罐发酵检测不到酶活
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最近在做发酵罐的实验,但发酵罐上做却检测不到酶活。我做的是里氏木霉产木聚糖酶,是一种丝状真菌。培养基的配方已经在摇瓶上优化好,并且在摇瓶里的酶活已经非常可观。在摇瓶里基本上发酵24h就能检测到酶活,48h后酶活就已经很明显了,最大酶活出现在第5天左右。 但悲剧的是我按照摇瓶的配方放大到30L发酵罐上(装液量10L)到现在已经50多小时了却几乎检测不到酶活,悲催的是这已经是第二罐了,两罐都是这样一直检测不到酶活,但菌体生长却很丰富。 与摇瓶不同的是,在罐上做的时候我加入了消泡剂GPE(添加量5ml/L),不知道是不是消泡剂的影响呢? 还有一个很重要的东西就是溶氧,在种子液接入罐中后几小时后溶氧迅速下降至0.2%左右,然后一直维持这个数值,到现在已经50多个小时,溶氧似乎有回升迹象(已经到1.0%左右),我的通风量是10L/min,是不是这个通风量小了的缘故。 望各位做发酵的高手支招啊,小弟在线等,感激不尽啊! |
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12楼2014-01-13 11:34:21
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【答案】应助回帖
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huangrui5036: 金币+50, ★★★很有帮助, 问题基本上已经解决了 2013-03-14 19:05:46
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huangrui5036: 金币+50, ★★★很有帮助, 问题基本上已经解决了 2013-03-14 19:05:46
| 看来是你控制条件不好,调节通气和转速,让溶氧保持一定水平,不要生长太快或者太慢。还有你的消泡剂量怎么那么多啊,我们一般30L才加5ml,消泡剂对菌体生长是有毒性的。而且你发酵罐肯定比摇瓶培养量大了,可能得多培养会儿才会有酶活。要多试几次,摸一下发酵罐的培养条件。 |
3楼2013-01-17 09:23:46
huangrui5036
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