应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 哪位熟悉枯草杆菌表达系统前辈，来帮忙解决一下小妹的实验啊！做不完怎么过年啊！！！
383/4返回列表上一页1234下一页
查看: 1660  |  回复: 37
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

alice

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by snoopyzxx at 2013-01-18 18:16:56
那先谢谢你了啊。
如果可以，我可以用我们实验室的东西交换，我主要有大肠杆菌表达的质粒和菌株，毕赤酵母表达的相关资源。...

问一下你是哪边的呢？
赞一下 回复此楼
To be strong enough
21楼2013-01-19 09:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dmzha

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by alice at 2013-01-18 11:23:48
对了，枯草的表达要多长时间才能有蛋白表达？...

我不是做这方面的，细菌发酵24h以内就可以吧
赞一下 回复此楼
22楼2013-01-19 21:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alfdragon

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
alice: 金币+3, ★有帮助, 谢谢！我们目前的条件只能是这样的步骤，每一步都是验证正确后才往下进行的。 2013-01-20 11:45:39
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-01-23 16:05:33
这个很难说的，以前跟导师在哈佛麻省总医院做访问的时候那边的researcher好像做过类似的实验，不过用的载体好像不是你这种。相关文章应该能搜到，做实验不能太sterotype，他们那边用的系统是封闭automic的，你的步骤明显太complex，如果没有条件建议细心重新把每一步重新做一下。
赞一下 回复此楼
23楼2013-01-20 00:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alfdragon

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
alice: 金币+2, 谢谢啊，我们的酶活测定过程也是没有问题的，只是有其他方面想请教，您对这方面了解的多吗？ 2013-01-20 11:47:30
刚才说的太simple，步骤太多难免会出现小bug，建议你先看一下是不是因为测酶活性底物失去活性了。
赞一下 回复此楼
24楼2013-01-20 00:41:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alice

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by dmzha at 2013-01-19 21:16:18
我不是做这方面的，细菌发酵24h以内就可以吧...

好的，谢谢了，我再继续努力下
赞一下 回复此楼
To be strong enough
25楼2013-01-20 11:59:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiwei_l

木虫 (职业作家)

有理想的人
楼主加油
回复此楼
有志青年
26楼2013-01-20 13:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alice

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
26楼: Originally posted by weiwei_l at 2013-01-20 13:26:53
楼主加油

嗯，嗯，谢谢啊！
回复此楼
To be strong enough
27楼2013-01-20 14:10:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alice

铁杆木虫 (正式写手)
还有没有高人呢？能不能给指导下呢？
赞一下 回复此楼
To be strong enough
28楼2013-01-23 10:06:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zd1213

银虫 (小有名气)
建议先把构建好的重组质粒拿去测序，确保碱基都是正确的；然后跑SDS-PAGE确认是否有条带；如果仍然不行的话，还有一个办法，就是用RT-PCR确认下转录这一步是否有问题，如果这一步有，SDS没有，那就有可能是翻译的那一步出问题了。可以试试。
赞一下 回复此楼
29楼2013-01-28 16:31:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zd1213

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
alice: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 分析的很全面啊，很有参考价值！会考虑您的建议，进一步验证。谢谢！！！ 2013-01-28 16:46:04
建议先把构建好的重组质粒拿去测序，确保碱基都是正确的；然后跑SDS-PAGE确认是否有条带；如果仍然不行的话，还有一个办法，就是用RT-PCR确认下转录这一步是否有问题，如果这一步有，SDS没有，那就有可能是翻译的那一步出问题了。可以试试。
赞一下 回复此楼
30楼2013-01-28 16:43:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 alice 的主题更新
383/4返回列表上一页1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +10 晴天加油 2026-08-26 11/550 2026-08-27 16:35 by msuhlx
[基金申请] 青基如何破局 +3 lyz123lyz 2026-08-27 4/200 2026-08-27 13:08 by kulium
[基金申请] 基金不中，共勉 +8 eulota 2026-08-26 8/400 2026-08-27 12:34 by lice_1987
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭