31楼: Originally posted by Dannel_yan at 2013-04-27 21:07:14
同时天涯枯草人，我连质粒都没有，麻烦楼主发一份P43的启动子序列给我，我的邮箱是13601540580@163.com，马上就研三了，和楼主一样着急啊。

32楼: Originally posted by 木木祖儿 at 2013-05-24 15:47:14
我也是做枯草的，也是用的P43和NPRB表达抗原片段，但是在构建质粒时一直连不上，请教经验啊！

34楼: Originally posted by alice at 2013-05-28 09:14:13
你用的什么载体？连接本身就是一个很麻烦的问题，要尽量用穿梭质粒，先在大肠杆菌构建好才利于枯草转化啊！...

35楼: Originally posted by 木木祖儿 at 2013-05-28 12:38:36
我用的是PMK3但是一直连不上，在大肠杆菌中得不到阳性质粒，现在构建了一个整合载体，连接还是有问题。...

36楼: Originally posted by alice at 2013-05-28 13:54:36
哦，连接的问题你要做个对照看看了，搞清楚是酶切的问题还是连接体系，连接酶的问题。你连接的片段大吗？有时候一点点的差别结果还是很不一样的。。。...

8楼: Originally posted by scienzyme at 2013-01-17 21:26:11
枯草杆菌分泌表达有两种系统，Sec和Tat。nprB信号肽属于Sec系统。Tat分泌系统近年来受到重视，具有一些Sec系统没有的优点。但是无论哪个系统，都不能保证你的目的产物一定能够分泌成功。
遇到分泌失败，首先要检查 ...