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哪位熟悉枯草杆菌表达系统前辈,来帮忙解决一下小妹的实验啊!做不完怎么过年啊!!!
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本人做一个大黄欧文菌来源的蔗糖异构酶的表达,这基因已经在大肠杆菌里表达过了,想在枯草杆菌里表达,用的PHY300的穿梭质粒做载体,加了P43的启动子,构建时P43和目的基因之间加入一个酶切位点,现在转化完成,质粒双酶切验证正确。但37度下表达两天后仍测不到酶活,哪位前辈以前做过的,可不可以给指导下我的问题是出在哪了?是本身异源表达有问题,还是载体的问题,还是表达条件的问题???马上要放假了,研究生最后一年,不想过年回来还纠结这些实验啊 ………………![]() |
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dmzha
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scienzyme
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