2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-15 08:37:54
你描述得有些混乱。
你的受体菌不是大肠杆菌？你是利用接合把构建好的质粒由大肠杆菌介导转入受体细胞吗？转化后筛选板上长得都是大肠杆菌？
会不会是平板上杀大肠杆菌的成分浓度低了，杀得不彻底？

3楼: Originally posted by chuxuan at 2013-01-15 10:22:37
我的供体菌是大肠（载体转化到大肠的），受体菌是一株光合细菌。您说得浓度低了，应该是不会的。。我有从做接合长出来的，挑到含有杀大肠的平板上养过，它是长不了的。。但直接挑到没有杀大肠药物的固体LB平板上， ...

4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-15 11:29:09
我也做一些接合转移。有时候就是在转化的平板上除了受体菌以外还会有大肠杆菌的污染。这样很头疼，一般是要划线N次才能清除干净。不太清楚为什么你的受体菌没有长。可能是没有接合成功吧。试试再转一次看。...

5楼: Originally posted by chuxuan at 2013-01-15 15:24:57
我坚持不懈的做了半学期。。。就是没做出来。。。头很大。。。有时候长出来的接合子，我挑了3 4百个，就都是大肠。。。很是郁闷。。难道受体菌都死翘翘了。。。您的接合转移的方法能否发给我参考下。。。会不会方法 ...

6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-15 15:53:49
我转的是蓝藻，克隆是绿的。所以不会发生你说的情况。不知道对你的有没有帮助。
大致的方法如下：
把受体菌、含有克隆载体的e.coli，还有一个带有helper质粒的e.coli混起来。先是把helper菌和有载体的菌离心，用 ...

7楼: Originally posted by chuxuan at 2013-01-16 09:30:21
谢谢啦。。。方法差不多。。。真不知道哪出问题了。。。你做藻基因工程的？博士？...

8楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-16 09:33:12
做藻和植物的分子、生化，博后。...

9楼: Originally posted by chuxuan at 2013-01-16 09:36:36
牛人啊。。。能否给个联系方式。。。可以交流下。...