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求大神啊，双交换，筛突变株的时候出问题了。
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要敲掉目的菌株染色体的一个基因。。。 用另外一个外源基因替换它。。。构建了一个敲出载体。（该载体，包含了要敲除的目的菌株基因的上下游臂，然后把这个外源基因和筛选标记连到上下游臂间，进行双交换）载体转化到特定的大肠中。 采用接合转移，做双交换，但长出来的菌，进行筛选的时候，都是大肠，没有我那株菌，到底是怎么回事呢。。。（做接合的时候，我在平板上有加一种可以杀大肠的，但大肠怎么还长呢，我有做对照，大肠在那种东西下是长不了的） |
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