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cai3110274

木虫 (职业作家)
引用回帖:
9楼: Originally posted by reninhat at 2013-01-13 17:12:29
不知道用的是谁家的PCR仪和管子啊

都是AB的 呵呵
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夫天地者万物之逆旅
11楼2013-01-14 07:54:40
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stewart3261

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cai3110274: 金币+3, ★★★很有帮助, 嗯 好的 非常感谢指导 2013-01-15 10:37:30
cai3110274: 金币+7, ★★★很有帮助, 原来可以追加金币 2013-01-15 10:39:28
从熔解曲线来看，你的引物比较好，没有非特异性扩增。要求完全没有扩增就试试换掉所有的管子和试剂，全部用新的。如果真是基因组污染，而又不知道是什么地方污染，只能替换！你是做相对定量，标曲要求没有那么严格！
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12楼2013-01-14 09:23:04
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reninhat

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by cai3110274 at 2013-01-14 07:54:40
都是AB的 呵呵...

有空试试我家自己造的管子吧。
http://www.gsbio.cn/
刚刚和杭州艾力康、302、福州泰普签约供管子了
价格便宜量又足
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13楼2013-01-14 13:38:39
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
cai3110274: 金币+10, ★★★很有帮助, 嗯 原来40循环 现在准备降到35试试看 呵呵 2013-01-15 10:29:33
引用回帖:
10楼: Originally posted by cai3110274 at 2013-01-14 07:54:18
再请问下  DNase消化的时候  RNA会降解吗   多少时间为合适呢？  我现在用的 TAKARA的 反转录试剂盒    42℃2min 。再次表示感谢。...

DNase要用RNase-free的，理论上消化过程中不会降解RNA。消化时间根据买的酶稍有些不同，时间和温度按照说明做就可以了。酶的作用效果也和样品中DNA含量有关。因为你的负对照有扩增，如果不是引物引起的话，可能是DNA消化时稍微欠缺，稍微延长一点就可以了。
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14楼2013-01-14 15:16:44
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872940890

铁虫 (小有名气)
★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-15 13:52:41
可能你的循环数有点多了 退火时间可以适当降低
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

cai3110274
我知道我得继续努力！加油！
15楼2013-01-14 16:07:35
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cai3110274

木虫 (职业作家)
送鲜花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by 872940890 at 2013-01-14 16:07:35
可能你的循环数有点多了 退火时间可以适当降低

原来40循环 现在准备降到35试试看 呵呵  本来金币想给你 手一抖 加给楼上了 不好意思 送你小红花吧  非常感谢你的回答
赞一下 回复此楼
夫天地者万物之逆旅
16楼2013-01-15 10:36:49
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