| 查看: 4383 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
tys0713104木虫 (正式写手)
|
[交流]
求测巯基的方法 已有7人参与
|
||
| 小弟我最近要检测PEG连上的多肽量，想通过打断多肽的二硫键检测巯基的含量来定。我用TCEP打断二硫键后，DNTB检测巯基。但样品中的TCEP明显影响到DTNB的检测。求教还有什么高招解决小弟的燃眉之急！谢谢大神们！ |
回复此楼» 猜你喜欢
体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层，如同你们一样大部分普通教师忙且收入低
已经有13人回复
-
为什么中国大学工科教授们水了那么多所谓的顶会顶刊，但还是做不出宇树机器人？
已经有8人回复
-
版面费该交吗
已经有8人回复
-
面上可以超过30页吧？
已经有4人回复
-
“人文社科而论，许多学术研究还没有达到民国时期的水平”
已经有5人回复
-
什么是人一生最重要的？
已经有4人回复
-
今年春晚有几个节目很不错，点赞！
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 巯基可以检测什么物质？
已经有3人回复
- 急寻求测定蛋白质二硫键（应用到NTSB试剂的实验方法）后的计算方法
已经有5人回复
- HPLC测试结果不一致，求解决方法！！
已经有35人回复
- 求土壤测定NPK简便方法，待测液最好能一次消煮好
已经有12人回复
- 求助：测定色素稳定性的标准方法
已经有12人回复
- 求滴定分析测试复杂体系中负二价硫离子的方法
已经有7人回复
- 求陶瓷热振性测试方法
已经有4人回复
- 求固体紫外的测量方法
已经有12人回复
- 求测定谷氨酰胺酶酶活的标准方法，包括分解和转化的酶活，还有些别的困惑，望关注
已经有1人回复
- 求助巯基的测定
已经有4人回复
- 紧急求助测定脂肪醇聚氧乙烯醚活性物含量的方法？
已经有9人回复
- 【求助】由溴代烷合成巯基的方法
已经有12人回复
- 【求助】请求测三价铁含量的分析方法
已经有10人回复
- 【求助】求测量聚酯长链上磺酸基含量的方法
已经有6人回复
- 【求助】测扩散系数的实验方法
已经有11人回复
- 急问巯基怎么检测？
已经有2人回复
- 【求助】材料成分的测试方法
已经有40人回复
- 【求助】测水的COD操作方法（国标）
已经有20人回复
- 【求助】求胺值测定的具体方法
已经有3人回复
1012203014
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 334.1
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 395
- 在线: 232.6小时
- 虫号: 1349300
- 注册: 2011-07-18
- 性别: GG
- 专业: 化学反应工程
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 问题1：上述公式中稀释倍数D是怎么算的（具体的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 问题2：我测的物质为毛发固体样品，二硫键含量在350μmol/g附近，此种测试方法是否具有可行性 问题3：由于毛发样品中含有非水溶性蛋白，又没哟测量二硫键含量的更好的方法 |
3楼2015-09-29 09:11:49
wshi85
木虫 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1495.7
- 散金: 8
- 红花: 5
- 帖子: 687
- 在线: 213.9小时
- 虫号: 584125
- 注册: 2008-08-01
- 性别: GG
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
2楼2013-01-11 16:47:18
1012203014
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 334.1
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 395
- 在线: 232.6小时
- 虫号: 1349300
- 注册: 2011-07-18
- 性别: GG
- 专业: 化学反应工程
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 问题1：上述公式中稀释倍数D是怎么算的（具体的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 问题2：我测的物质为毛发固体样品，二硫键含量在350μmol/g附近，此种测试方法是否具有可行性 问题3：由于毛发样品中含有非水溶性蛋白，又没哟测量二硫键含量的更好的方法 |
4楼2015-09-29 09:12:10
5楼2015-12-12 10:40:50