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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[求助] 求助各位大神，巯基含量如何测定！急急急~~~~~~~~~

求助各位大神，巯基含量如何测定！急急急~~~~~~~~~
我想用Ellman 法测定巯基含量，但是方法中的公式没有看明白，其中D稀释因子是如何计算出来的？请做过的大神给我留言，谢谢~~~~~
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1楼 2013-01-11 10:32:34
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

春天里的麦子

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xy656691: 金币+5, 应助指数+1 2013-01-16 08:12:56
一个半胱氨酸HOOC-CH（NH2）-CH2-SH里面有一个巯基（-SH）呀，所以知道半胱氨酸也就知道巯基的量了
用红外衍射，紫外分光光度应该也可以测，直接得到硫含量就好了
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真奇妙
4楼2013-01-14 01:02:45
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xujunpkusz

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Pierce 有个试剂盒 里面的说明书对原理和方法都说得比较清楚，连接：http://www.piercenet.com/instructions/2160311.pdf
希望能帮上你。
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7楼2013-01-17 15:07:17
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普通回帖

Jacob_24

木虫 (正式写手)
利用做标曲  不可以么？
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CCC
2楼2013-01-11 21:02:52
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zishilanxuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Jacob_24 at 2013-01-11 21:02:52
利用做标曲  不可以么？

我看过的 有的文献是做标曲，是做半胱氨酸含量的标曲，但是我没有弄明白半胱氨酸与巯基的关系，测出半胱氨酸怎么能转化到巯基含量。如果你以前做过的话，请你将你的方法发给我，谢谢~~~
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3楼2013-01-12 08:19:29
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zishilanxuan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 春天里的麦子 at 2013-01-14 01:02:45
一个半胱氨酸HOOC-CH（NH2）-CH2-SH里面有一个巯基（-SH）呀，所以知道半胱氨酸也就知道巯基的量了
用红外衍射，紫外分光光度应该也可以测，直接得到硫含量就好了

那问一下，蛋白中的巯基都是以半胱氨酸的形式存在么？如果利用标曲法，能完全表示出溶液中的巯基含量么？我如果想用Ellman公式测得话，请问给位，D（稀释因子）是固定的还是通过计算得出的？怎么得到的？谢谢各位！！！！！
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5楼2013-01-14 08:20:08
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春天里的麦子

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zishilanxuan at 2013-01-14 08:20:08
那问一下，蛋白中的巯基都是以半胱氨酸的形式存在么？如果利用标曲法，能完全表示出溶液中的巯基含量么？我如果想用Ellman公式测得话，请问给位，D（稀释因子）是固定的还是通过计算得出的？怎么得到的？谢谢各位！ ...

蛋白质中的巯基不都以半胱氨酸形式存在，其他氨基酸中也可以有应该。至于其他的，不好意思，我是搞化学的，飘过。。。
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真奇妙
6楼2013-01-15 18:41:54
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
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8楼2013-09-07 13:40:30
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小馨月

金虫 (著名写手)
大神，我也在做这个那个公式你弄明白了吗，求交流
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9楼2015-12-30 20:36:41
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十口土申

新虫 (小有名气)
在小木虫上看到你提到的巯基含量的测定，我想问一下你怎么测得，研一开始做实验了，遇到问题了，，，急急急。谢谢
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10楼2017-03-08 16:54:09
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