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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr产物条带很弱，怎么能改善下
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iKing.cn

银虫 (著名写手)
多做3-5个循环试试
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11楼2013-01-10 00:03:37
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txw87

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主要固定模板的加入量，你光说1 μL、2 μL的，又没说浓度，根本没法体现加入量。

另外，PCR的模板量不是加的越多越好，你在优化模板量的时候，尝试增加或者减少模板量，都要试试。

体系先不用换吧，既然能P出来就先用着，先考察模板量，每次做一个阳性对照和一个阴性对照。
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12楼2013-01-10 13:38:26
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你用PCR产物再做模板再PCR，同时增加循环数
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
13楼2013-01-10 13:52:35
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公子_小白

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小小技术官 at 2013-01-09 13:14:59
引物会不会反复冻融了呢 这个很受影响的

我新配了引物，结果还是一样。。。
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14楼2013-01-10 14:04:22
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公子_小白

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by anfanlinli at 2013-01-09 14:00:37
你跑兴城群体的时候pcr产物假如很好，而另一个不行，可以看看是不是引物结合区有SNP位点，可以用 blast比对一下看看，假如是有SNP可以加一条简并引物。
不想那么麻烦就增加循环数用磁珠法富集PCR产物。当然你先保证 ...

我用的就是简并引物。。。
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15楼2013-01-10 14:04:55
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erlangshen89

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by txw87 at 2013-01-10 13:38:26
楼主要固定模板的加入量，你光说1 μL、2 μL的，又没说浓度，根本没法体现加入量。

另外，PCR的模板量不是加的越多越好，你在优化模板量的时候，尝试增加或者减少模板量，都要试试。

体系先不用换吧，既然能 ...

你好，我用PCR产物做模板扩增的时候没有扩增出目的条带，请问有什么解决办法吗？谢谢呀
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16楼2013-01-10 15:31:04
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txw87

木虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by erlangshen89 at 2013-01-10 15:31:04
你好，我用PCR产物做模板扩增的时候没有扩增出目的条带，请问有什么解决办法吗？谢谢呀...

给你发了站内信，私聊吧，别占用人家帖子
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17楼2013-01-10 18:13:28
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real-gold

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by anfanlinli at 2013-01-09 14:00:37
你跑兴城群体的时候pcr产物假如很好，而另一个不行，可以看看是不是引物结合区有SNP位点，可以用 blast比对一下看看，假如是有SNP可以加一条简并引物。
不想那么麻烦就增加循环数用磁珠法富集PCR产物。当然你先保证 ...

请教一下，磁珠法怎么富集PCR产物？要买专门的富集试剂盒》
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18楼2013-01-11 10:19:57
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俊锋

新虫 (初入文坛)
学习啦
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19楼2016-03-13 10:19:21
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