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iKing.cn

银虫 (著名写手)

多做3-5个循环试试
11楼2013-01-10 00:03:37
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txw87

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主要固定模板的加入量,你光说1 μL、2 μL的,又没说浓度,根本没法体现加入量。

另外,PCR的模板量不是加的越多越好,你在优化模板量的时候,尝试增加或者减少模板量,都要试试。

体系先不用换吧,既然能P出来就先用着,先考察模板量,每次做一个阳性对照和一个阴性对照。
12楼2013-01-10 13:38:26
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你用PCR产物再做模板再PCR,同时增加循环数
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
13楼2013-01-10 13:52:35
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公子_小白

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小小技术官 at 2013-01-09 13:14:59
引物会不会反复冻融了呢 这个很受影响的

我新配了引物,结果还是一样。。。
14楼2013-01-10 14:04:22
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公子_小白

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by anfanlinli at 2013-01-09 14:00:37
你跑兴城群体的时候pcr产物假如很好,而另一个不行,可以看看是不是引物结合区有SNP位点,可以用 blast比对一下看看,假如是有SNP可以加一条简并引物。
不想那么麻烦就增加循环数用磁珠法富集PCR产物。当然你先保证 ...

我用的就是简并引物。。。
15楼2013-01-10 14:04:55
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erlangshen89

木虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by txw87 at 2013-01-10 13:38:26
楼主要固定模板的加入量,你光说1 μL、2 μL的,又没说浓度,根本没法体现加入量。

另外,PCR的模板量不是加的越多越好,你在优化模板量的时候,尝试增加或者减少模板量,都要试试。

体系先不用换吧,既然能 ...

你好,我用PCR产物做模板扩增的时候没有扩增出目的条带,请问有什么解决办法吗?谢谢呀
16楼2013-01-10 15:31:04
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txw87

木虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by erlangshen89 at 2013-01-10 15:31:04
你好,我用PCR产物做模板扩增的时候没有扩增出目的条带,请问有什么解决办法吗?谢谢呀...

给你发了站内信,私聊吧,别占用人家帖子
17楼2013-01-10 18:13:28
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real-gold

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by anfanlinli at 2013-01-09 14:00:37
你跑兴城群体的时候pcr产物假如很好,而另一个不行,可以看看是不是引物结合区有SNP位点,可以用 blast比对一下看看,假如是有SNP可以加一条简并引物。
不想那么麻烦就增加循环数用磁珠法富集PCR产物。当然你先保证 ...

请教一下,磁珠法怎么富集PCR产物?要买专门的富集试剂盒》
18楼2013-01-11 10:19:57
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俊锋

新虫 (初入文坛)

学习啦
19楼2016-03-13 10:19:21
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