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公子_小白

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr产物条带很弱,怎么能改善下

我做的是不同地理种群岩虫的COI基因多样性。引物已经设计好了,现在出现一个问题,就是我在跑兴城群体的时候条带很清晰,而且拿去测序的结果也回来了,也很好,但是我用相同的体系跑广西的群体时,就出现条带非常弱的现象,我试着加大了模板量(从1微加到2微),但是结果还是一样,我不清楚这是为什么,求高手帮忙,不胜感激~~~~~~
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erlangshen89

木虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by txw87 at 2013-01-10 13:38:26
楼主要固定模板的加入量,你光说1 μL、2 μL的,又没说浓度,根本没法体现加入量。

另外,PCR的模板量不是加的越多越好,你在优化模板量的时候,尝试增加或者减少模板量,都要试试。

体系先不用换吧,既然能 ...

你好,我用PCR产物做模板扩增的时候没有扩增出目的条带,请问有什么解决办法吗?谢谢呀
16楼2013-01-10 15:31:04
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查看全部 19 个回答

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你增加几个循环看看
shine
2楼2013-01-08 16:45:57
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的体系都重新优化一下吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2013-01-08 18:05:03
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lxbxk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果模板浓度很低的话,1微和2微本身就没啥区别,可以将其浓缩一下,再做,也可以试试增加酶和循环数
做开心的自己,加油
4楼2013-01-08 18:15:26
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