24小时热门版块排行榜    

查看: 4295  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

咆哮的白菜

金虫 (正式写手)

[求助] 酵母基因敲除回补实验

在用同源重组的方法把酵母的某个基因敲除以后,怎样做这个基因的回补实验?是用另外一个抗性基因连接同源片段和目的基因再次转入被敲除掉的酵母菌株内么?
如:上游同源+目的基因+新抗性+下游同源?是这样构建载体么?同源重组会不会因为两个片段的长度差异比较大而降低呢?
求高手详细解释实验原理和方法,谢谢!
回复此楼
姥姥不疼,舅舅不爱
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 咆哮的白菜 at 2013-01-10 17:42:31
谢谢,最后一问,能给一篇第一种方法的文献么?谢谢!...

我不做酵母,做藻和植物的,所以没有你要的酵母文献。
9楼2013-01-11 08:31:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般不能整合在同一位置,否则不能说明是否有位置效应。有两个办法来做,一个是整合到染色体上其它的某个位置上。一个是表达在质粒上。随便哪个都可以说明问题。
2楼2013-01-07 14:03:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咆哮的白菜

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-07 14:03:53
一般不能整合在同一位置,否则不能说明是否有位置效应。有两个办法来做,一个是整合到染色体上其它的某个位置上。一个是表达在质粒上。随便哪个都可以说明问题。

那如果说我不关心位置效应的话,是不是就可以按照我说的那样做?换一个抗性再交换回去?
姥姥不疼,舅舅不爱
3楼2013-01-07 14:59:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咆哮的白菜

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-07 14:03:53
一般不能整合在同一位置,否则不能说明是否有位置效应。有两个办法来做,一个是整合到染色体上其它的某个位置上。一个是表达在质粒上。随便哪个都可以说明问题。

还有就是,用我说的这种方法,换一个抗性连基因,重组回同一个位置以后,一般来说,能不能实验基因功能的完全恢复?包括位置效应。
姥姥不疼,舅舅不爱
4楼2013-01-07 15:17:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 找导师 +3 yuanjiabao 2026-08-29 4/200 2026-08-30 08:09 by zjb_nudt
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 06:57 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 06:13 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-30 06:00 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 02:09 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:45 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:34 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
请填处理意见