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yspain

新虫 (小有名气)

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专业: 植物遗传学

[求助] 求助~RACE扩增不出目的条带

求助。有一个基因5' 和3' 的目的条带分别是300BP和1000BP左右。但扩出来的条带都不是。设计好几次引物了（引物没问题），都扩不出来。其他基因也是用的相同的试剂盒和方法做的，都得到了目的条带，且测序结果也正确。
求助各位大侠，帮忙出个主意。谢谢啦~！

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1楼 2013-01-03 21:24:42

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音四1990

铁虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
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专业: 兽医免疫学

引用回帖:

7楼: Originally posted by wuping880315 at 2013-01-07 11:13:28
可能是模板的原因
我也遇到这个问题了
我上个月已经扩出来了
但是现在模板用完了换其他模板却扩不出来了
同一个基因

我也是这样的情况……
之前都有结果的停了一段时间再去做就什么都没有了怒！
现在眼巴巴看着以前留下的图……扩不出来没办法做克隆测序……
泪目……
我做的一般2P时有不少带，3P还有两条到三条带，我老师告诉我的是全部测序，因为cDNA有时会短一点的，具体为什么我也不太清楚，但小片段测序出来好像也属于目的基因