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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 生物素标记葡萄糖氧化酶
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小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

[求助] 生物素标记葡萄糖氧化酶

老板让我标记葡萄糖氧化酶，我生物素标记抗体，效果很好，但不知道为什么一标记葡萄糖氧化酶，酶就失活了，怎么办啊？
还有，刚标记好直接用没问题，但是一放在-20度冰箱，酶就不行了
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1楼 2013-01-03 16:58:04
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royhahaha

木虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-20 08:49:42
你的那个判断说实话我没有理解。
针对你的步骤我有点疑问：
1. 你的单抗应该是已经纯化得到的对吧？
2. 你的单抗是5克溶于5mlPBS中？抗体浓度是1G/ml？你确定？？
3. 你的生物素浓度是4mg/ml？没错吧？
你先把 ...

我们要测定的抗原是在血浆中的，血清中基本不含有的。就像是D-D聚体一样，血浆中含有，血清中没有。
我标记完生物素，就经行了检测，结果血清和血浆都有了反应，就水没有反应。故现在初步判断抗体发生了变性。
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15楼2013-02-20 11:00:03
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zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的标记量是多少，是一份子酶一份子生物素么
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shine
2楼2013-01-04 16:01:10
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小小乖宝宝

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-04 16:01:10
你的标记量是多少，是一份子酶一份子生物素么

不是，是按照分子量1比20标记的
我现在想知道怎么能够去除未标记的生物素啊？
透析几次可以啊？
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3楼2013-01-04 16:47:39
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royhahaha

木虫 (小有名气)
★
wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2013-02-17 09:38:45
我想求助下这位虫友，你生物素标记抗体时怎么标记的？  能否告诉下流程， 最近做了一个生物素标记，标记完后，结果抗体变性了。检测有非特异性反应。 悲剧的很啊
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4楼2013-02-16 11:32:26
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