应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 生物素标记葡萄糖氧化酶
52/1返回列表
查看: 1492  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

[求助] 生物素标记葡萄糖氧化酶

老板让我标记葡萄糖氧化酶，我生物素标记抗体，效果很好，但不知道为什么一标记葡萄糖氧化酶，酶就失活了，怎么办啊？
还有，刚标记好直接用没问题，但是一放在-20度冰箱，酶就不行了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-01-03 16:58:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 一步一步 at 2013-02-19 08:54:19
你的抗体发生非特异性反应指的是什么？？
NHS-Biotin必须用有机试剂溶解的，用DMSO或者DMF都没有问题。单抗或者多抗都不会都什么问题。
你要是说抗体变性，我想问一下，你用DMSO将NHS-Biotin溶解成了多大的浓度啊 ...

我的过程是这样的：
1、先将单抗IgG 5g溶于5ml的 PH7.4的PBS缓冲液
2、称600微克的NHS-Biotin溶于150微升的DMSO中
3、然后在磁力搅拌的条件下，将NHS-Biotin的DMSO溶液加入到5ml的PBS缓冲液中，进行生物素标记反应。
4、反应40-60min后进行透析处理。
如果你有什么好的意见请直接提出来啊。  多谢啦

我说的抗体变性是指：因为标记的是单抗，我们用水、血清、血浆作为样本反应，结果水没反应，血清和血浆都有反应。而抗原是血浆中才有的，血清中基本没有的。故初步判断，是出现了抗体变性。导致了非特异行反应。
赞一下 回复此楼
12楼2013-02-19 16:47:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的标记量是多少，是一份子酶一份子生物素么
赞一下 回复此楼
shine
2楼2013-01-04 16:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-04 16:01:10
你的标记量是多少，是一份子酶一份子生物素么

不是，是按照分子量1比20标记的
我现在想知道怎么能够去除未标记的生物素啊？
透析几次可以啊？
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-04 16:47:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

royhahaha

木虫 (小有名气)
★
wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2013-02-17 09:38:45
我想求助下这位虫友，你生物素标记抗体时怎么标记的？  能否告诉下流程， 最近做了一个生物素标记，标记完后，结果抗体变性了。检测有非特异性反应。 悲剧的很啊
赞一下 回复此楼
4楼2013-02-16 11:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +6 yexuqing 2026-04-19 7/350 2026-04-23 12:32 by yexuqing
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +18 花田半亩～白 2026-04-21 18/900 2026-04-23 11:31 by 12021227
[考研] 有没有学校收留 +3 蒋昌鹏qtj 2026-04-20 3/150 2026-04-22 20:25 by 学员JpLReM
[考研] 312求调剂 +3 山河似你温柔 2026-04-22 3/150 2026-04-22 20:17 by 学员JpLReM
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[论文投稿] 急需审稿人！！！ +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考研] 337求调剂 +3 jyz04 2026-04-18 3/150 2026-04-20 12:24 by 研可安
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭