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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-04 11:35:28
ljapril: 金币+2, 有帮助 2013-01-07 09:48:41
引用回帖:
8楼: Originally posted by ljapril at 2013-01-02 09:29:04
湿转,两个半小时,250mA,因为蛋白分子量大,就多转了会,这样对结果有什么影响呢?...

湿法不会是膜干掉了啊,半干有时候会的,膜刚拿出来就是这样吗?多转会没事的,我还转过3个小时的。一般不要让体系发热就行了,最好放到层析柜里或者cold room做。
11楼2013-01-02 11:01:18
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-01-04 11:35:37
ljapril: 金币+2, 有帮助 2013-01-07 09:48:53
不碍事
一般转完膜用PBST轻轻漂一下 如果蛋白总量多就能看到条带的
尤其做纯化的蛋白条带浓度梯度的时候 看的非常明显
都不用染色就看得到条带越来越粗
12楼2013-01-03 03:28:39
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jimmy7633

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的PVDF膜在甲醇里浸过没,像是没浸过。
13楼2013-01-03 19:35:07
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happypl

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
就是你的膜干了哈,建议用预染Marker,那个有指示作用
14楼2013-01-04 10:01:28
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zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大的maker甲状腺球蛋白这个是60万的,不贵。 低电流长时间、转移即可。中间的花影很说明问题!
shine
15楼2013-01-04 17:08:04
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ljapril

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by greenygreen at 2013-01-02 10:32:18
这是三明治有点短路,电流太大产生的效果。我也遇见过,不过似乎后续的结果还可以。Fermantas有一款300K的预染彩色marker,小贵。但是至少有的用。祝顺利~

哦,我就是没看到哪里有大的marker,谢谢哈
16楼2013-01-07 09:43:51
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ljapril

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by jimmy7633 at 2013-01-03 19:35:07
你的PVDF膜在甲醇里浸过没,像是没浸过。

浸过了
17楼2013-01-07 09:49:29
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oranzxc

金虫 (初入文坛)

如果western blot叫WB的话,那southern blot岂不是SB了
18楼2013-01-07 10:28:13
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wdlnjau

银虫 (小有名气)

个人觉得你买的PVDF膜是有正反面的,你转到反面了
我们的心憧憬着未来,有的时候,现实也许会令我们沮丧,但是这一切都是暂时的、转瞬即逝的,而那些逝去的,终将变得可爱和美好。
19楼2013-05-15 10:07:53
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