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ljapril

新虫 (初入文坛)

[求助] WB转膜后出现的问题

做WB,需要转一个快300KD的蛋白,转完膜后发现上面的泳道特别清楚,这是怎么回事呢?之前做过一些100一下的蛋白,转过的膜都是白色的,什么都看不到的,这次很奇怪,有谁晓得这是怎么回事吗

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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-01-04 11:35:37
ljapril: 金币+2, 有帮助 2013-01-07 09:48:53
不碍事
一般转完膜用PBST轻轻漂一下 如果蛋白总量多就能看到条带的
尤其做纯化的蛋白条带浓度梯度的时候 看的非常明显
都不用染色就看得到条带越来越粗
12楼2013-01-03 03:28:39
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Lester11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
染色后还是染色前的图像?
Followyourheart!
2楼2013-01-01 21:36:41
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Lester11

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


ljapril: 金币+1, 有帮助 2013-01-07 09:47:56
如果染色后出现清晰的泳道,那就说明western blot和转膜效果还不错,但是染色前这样那就说不通了。
Followyourheart!
3楼2013-01-01 21:39:25
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ljapril

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Lester11 at 2013-01-01 21:39:25
如果染色后出现清晰的泳道,那就说明western blot和转膜效果还不错,但是染色前这样那就说不通了。

这是丽春红染后又洗掉的样子,但是膜刚拿出来是也和这个差不多哦
4楼2013-01-01 21:47:23
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