应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 好不容易得到的单克隆莫名其妙的没了
41/1返回列表
查看: 1073  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

desheng101

木虫 (正式写手)

[交流] 好不容易得到的单克隆莫名其妙的没了 已有3人参与

花了几个月的时间做酶切连接，终于有一线希望。有单克隆挑取酶切鉴定测序基本能确定就是了。昨天把单克隆的菌质粒重新提取一下准备下一步，双酶切怎么也切不出来2条带，我真是无语了，以前能切出来，现在就一条带，貌似是载体的条带。实在不知道什么原因
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-12-31 22:43:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxf-er

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
切不出来很正常，另外你提供的信息太少了，不好判断，给你说下可能的原因和验证方式。有很多原因造成酶切不出来：1.假阳性；2.确定有没转进去，可以先尝试做菌液PCR（挑单克隆后摇菌培养，用菌液直接做模板），做好对照。3.阳性PCR的菌液，再提质粒跑胶检测大小是否正确。4.酶切吧，做阴阳对照最好。如果前3步骤都正确，或者菌液PCR有阳性，可以先去测序验证，至于最后酶切--------
赞一下 回复此楼
自然
2楼2013-01-01 01:59:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用单酶切看一下质粒大小是不是对。此外，你的插入片段多大？可以看到载体大小片段，是不是小片段太暗没看清啊。做酶切的时候你是否做了载体酶切对照？确定得到的片段和载体一样大吗？会不会是有一个酶没起作用呢？
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-01 03:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你不是有原来测序正确的质粒么
重新转进去就可以了 也不麻烦
长期保存还是保存质粒
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-03 03:33:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 desheng101 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +9 Mr. Z 2026-03-25 9/450 2026-03-26 10:36 by baoball
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +3 地球绕着太阳转 2026-03-23 3/150 2026-03-25 19:10 by 雾散后相遇lc
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭