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cdmmore

铜虫 (小有名气)

[求助] pET31b双酶切为何只有一条带呀???

各位大侠好,最近我用pET31b空质粒做Nde1和Xho1双酶切,两酶之间大约有380 bp,但为何双酶切后看不到380 bp的条带呢??两种酶没有问题,已经验证过单酶切都能切开,双酶切也能切开,大小是对的,但就是没有切下来的小片段,这是为何呀???
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cdmmore: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢,学习了 2012-12-30 13:07:47
其实应该是你没看见,条带亮度都是和质量成正比的,你切下来的380bp片度与你的质粒摩尔量是一样的,那么你能期待它有多亮啊(估计只有你质粒亮度的十几分之一)?我觉得仔细看还是有的,不过用成像系统估计是看不见的。做分子的眼睛都是练出来的,特别是一些先双酶切再胶回收的,经常看不清!
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
3楼2012-12-30 02:13:05
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