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饺子813

铜虫 (小有名气)

[交流] 小鼠血浆中药物浓度测定的问题 已有2人参与

最近要用HPLC法测定小鼠血浆中药物浓度,以前从来没用过HPLC,所以有很多问题不明白,请各位大侠帮忙解惑~
1、为什么要用到空白血浆?
将取出的血预处理,用有机溶剂把要测的药物萃取出来,加入溶剂溶解之后进样,将标准品也用相同溶剂溶解不行吗,不明白为什么还要加入空白血浆?
2、为什么样品中要加内标物?
我记得以前学分析好像是标准曲线法和内标法,外标法等都可以测定含量,为什么现在看到文献当中既要用标准曲线测,又要加内标呢?目的是什么?
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Dweaver

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1、测体内药物浓度一般用质谱,血浆中药物浓度一般比较低,液相的灵敏度可能达不到
2、前处理的血浆基质可能会对药物产生基质效应,影响药物的峰面积大小,标品里加血浆进行处理,就是为了减小血浆基质的影响
3、它的标准曲线是以浓度为横坐标,药物与内标峰面积比值为纵坐标得到的
天真无鞋
2楼2012-12-28 16:54:31
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饺子813

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Dweaver at 2012-12-28 16:54:31
1、测体内药物浓度一般用质谱,血浆中药物浓度一般比较低,液相的灵敏度可能达不到
2、前处理的血浆基质可能会对药物产生基质效应,影响药物的峰面积大小,标品里加血浆进行处理,就是为了减小血浆基质的影响
3、 ...

谢谢你的回答!
查的文献中我用的药有比较可靠的HPLC检测方法,而且由于建立一个新的血药浓度检测方法不是我试验的重点,所以想有现成的就先试试看~
3楼2012-12-28 17:11:35
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wxf302302

银虫 (小有名气)

★
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1、现成不了,血浆里的药物测定回收率较低,设置空白血清做标准曲线,可一定程度上消除其带来的影响。所以这个是必须的
2、做血药测定,内标法是首选。血样的前处理涉及很多步的移取,都会带来很大的损失。内标法比外标法能更好的消除带来的误差。
4楼2012-12-29 08:29:30
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饺子813

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wxf302302 at 2012-12-29 08:29:30
1、现成不了,血浆里的药物测定回收率较低,设置空白血清做标准曲线,可一定程度上消除其带来的影响。所以这个是必须的
2、做血药测定,内标法是首选。血样的前处理涉及很多步的移取,都会带来很大的损失。内标法比 ...

谢谢同学!受教了~
5楼2012-12-30 20:20:45
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