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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 请教使用gel red 染料的同学们,你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的?

求助!!!
实验室换了安全燃料 gelred,但是跑出的条带不是弯曲的笑脸型就是 w型的。燃料美国总部建议使用纯度更好的琼脂糖,一时也不知道该用什么。
所以 在此发问,有没有哪位同学同样使用gelred 的,电泳条带没有问题的
你们使用的琼脂糖的品牌、型号。能帮忙起身去看看货号更好!谢谢各位了、

顺便,如果有同学觉得问题不在琼脂糖,也可以指出来。。。


120V 20 min,缓冲液 1x TAE,  TAKARA 的loading buffer 6X ,琼脂糖是西班牙进口的 G10,与之前用EB 后染的条件一模一样。 但是电泳条带就是这个样子的。。希望指点。

1118.jpg
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-12-27 16:59:45
小丹木木: 回帖置顶 2012-12-27 16:59:47
后染跑什么染料都没关系,就看染料稳定不稳定,不稳定的话就比加到样里面消耗多很多,有点浪费.根据我用其他染料的经验,估计是加染料多了.loading buffer 不值钱,混入核酸染料的时候少加一些,比如是1/4,然后上样的时候先试试每个上样孔加不同量的混了核酸染料的loading buffer,会有一定范围跑出来合适的带的.从电泳图看,marker有6条带还歪,如果一般的样只有marker其中一条带那么多DNA的话,至少要比你现在用的要低6倍,推测低10倍可能就合适了。
为什么
7楼2012-12-25 00:39:28
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。
keepon
3楼2012-12-24 16:33:12
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2012-12-24 16:10:37
不是后染的吧?

之前是用EB 后染。 觉得麻烦又有危害 所以选择这个 在做胶的时候加进去。
4楼2012-12-24 20:50:17
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-12-24 16:33:12
我们用的是Biowest lot no是111860从来没出现过你这种问题。。。

你们也用gelred染液? 在做胶的时候按照1:10000 加进去吗额?
5楼2012-12-24 20:50:48
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