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老夏853铁杆木虫 (著名写手)
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[求助]
请教使用gel red 染料的同学们，你们使用的琼脂糖都是什么品牌什么型号的？
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求助！！！ 实验室换了安全燃料 gelred，但是跑出的条带不是弯曲的笑脸型就是 w型的。燃料美国总部建议使用纯度更好的琼脂糖，一时也不知道该用什么。 所以 在此发问，有没有哪位同学同样使用gelred 的，电泳条带没有问题的 你们使用的琼脂糖的品牌、型号。能帮忙起身去看看货号更好！谢谢各位了、 顺便，如果有同学觉得问题不在琼脂糖，也可以指出来。。。 120V 20 min，缓冲液 1x TAE， TAKARA 的loading buffer 6X ，琼脂糖是西班牙进口的 G10，与之前用EB 后染的条件一模一样。 但是电泳条带就是这个样子的。。希望指点。  1118.jpg |
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2楼2012-12-24 16:10:37
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-12-27 16:59:45
小丹木木: 回帖置顶 2012-12-27 16:59:47
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| 后染跑什么染料都没关系,就看染料稳定不稳定,不稳定的话就比加到样里面消耗多很多,有点浪费.根据我用其他染料的经验,估计是加染料多了.loading buffer 不值钱,混入核酸染料的时候少加一些,比如是1/4,然后上样的时候先试试每个上样孔加不同量的混了核酸染料的loading buffer,会有一定范围跑出来合适的带的.从电泳图看,marker有6条带还歪,如果一般的样只有marker其中一条带那么多DNA的话，至少要比你现在用的要低6倍，推测低10倍可能就合适了。 |
7楼2012-12-25 00:39:28
12楼2012-12-25 09:39:11
17楼2012-12-25 18:16:39