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免疫组化实验技术设计方案
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| 内容可深可浅,试验步骤定要严谨,有哪些可以参考的题目和实验方案呢?多多益善,集思广益 |
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| ( 1 )、石蜡切片脱蜡至水。 ( 2 )、 3%H 2 O 2 室温孵育 5-10 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。 ( 3 )、蒸馏水冲洗, PBS 浸泡 5 分钟 x2 (如需抗原修复,可在此步后进行)。 ( 4 )、 5-10% 正常山羊血清( PBS 稀释)封闭,室温孵育 10 分钟,倾去血清,勿洗。滴加 一抗 工作液, 37 ℃ 孵育 1-2 小时或 4 ℃ 过夜。 ( 5 )、 PBS 冲洗, 5 分钟 x3 次。 ( 6 )、滴加适量 生物素标记二抗 工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。 ( 7 )、 PBS 冲洗, 5 分钟 x3 次。 ( 8 )、滴加适量的 辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素 工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。 ( 9 )、 PBS 冲洗, 5 分钟 x3 次。 ( 10 )、显色剂显色 3-15 分钟( DAB 或 NBT/BCIP ) ( 11 )、自来水充分冲洗,复染,脱水,透明,封片。 |
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