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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » IEF时间过长
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竹林里的小蛇

银虫 (小有名气)

[交流] IEF时间过长

1.我用的是17cm，pH3-10线性IPG胶条，等电聚焦程序如下：
17cm胶条：    水化                50V                        12-16小时（17℃）                        主动水化
S1                250V                     线性                30分钟        除盐
S2                1000V                快速                1小时        除盐
S3                10000V                线性                5小时        升压
S4                10000V                快速                60,000伏小时 聚焦
S5                500V                     快速                任意时间        保持
此程序是根据BIO-RAD公司的手册来的，可是在据聚焦时发现电压很小，离10000v很远，有时候只有三四千伏特，这样就导致聚焦时间很长。请问各位这是什么问题啊？
2.聚焦时在胶条两极均有棕黄色物质聚集，平衡时可以出去，感觉是溴酚蓝聚集了，大家对此有何看法呢？
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1楼 2012-12-22 10:06:34
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mguo15

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
竹林里的小蛇: 回帖置顶 2012-12-25 10:40:45
1。 可能是样品过多引起的离子浓度过高，建议你减少样品或用高纯的水配制胶后试试。

2。应该不是燃料，它只向一边跑吧，我宁愿猜是ampholyte的变性。
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27楼2012-12-25 10:30:06
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
竹林里的小蛇(金币+1): 谢谢参与
http://www.dxy.cn/bbs/topic/3222811
http://www.dxy.cn/bbs/thread/3202433#3202433
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8楼2012-12-22 10:46:27
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
竹林里的小蛇(金币+1): 谢谢参与
http://www.dxy.cn/bbs/topic/10461301
http://www.dxy.cn/bbs/topic/17781925
http://wenku.baidu.com/view/8c77b9305a8102d276a22f11.html
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9楼2012-12-22 10:47:24
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假大空

木虫之王 (文学泰斗)
★
竹林里的小蛇(金币+1): 谢谢参与
??
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10楼2012-12-22 10:49:39
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竹林里的小蛇11楼
2012-12-22 10:50   回复  
引用回帖:
5楼: Originally posted by 樱木花道6 at 2012-12-22 10:30:38

竹林里的小蛇12楼
2012-12-22 10:50   回复  
引用回帖:
6楼: Originally posted by 15929068450 at 2012-12-22 10:45:46

竹林里的小蛇13楼
2012-12-22 10:50   回复  
引用回帖:
7楼: Originally posted by 15929068450 at 2012-12-22 10:46:18

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