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IEF时间过长
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1.我用的是17cm,pH3-10线性IPG胶条,等电聚焦程序如下: 17cm胶条: 水化 50V 12-16小时(17℃) 主动水化 S1 250V 线性 30分钟 除盐 S2 1000V 快速 1小时 除盐 S3 10000V 线性 5小时 升压 S4 10000V 快速 60,000伏小时 聚焦 S5 500V 快速 任意时间 保持 此程序是根据BIO-RAD公司的手册来的,可是在据聚焦时发现电压很小,离10000v很远,有时候只有三四千伏特,这样就导致聚焦时间很长。请问各位这是什么问题啊? 2.聚焦时在胶条两极均有棕黄色物质聚集,平衡时可以出去,感觉是溴酚蓝聚集了,大家对此有何看法呢? |
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