| 查看: 2421 | 回复: 6 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
PGAPZA载体的使用
|
|||
| 各位大侠们，我想用毕赤酵母来表达谷胱甘肽合成酶基因，选用PGAPZA表达载体，直接找酶切位点和目的片段连接就可以了吗，为什么有的文献上说要再这个载体上加His4啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有184人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
-
两个氟原子与一段氨基甲酸甲酯：BLU-5937 的母液配制与稳定性边界
已经有0人回复
-
司美那非（TPN171）：从嘧啶酮母核到工艺放大的结构、色谱与质控参数解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 使用石墨烯作为载体的催化剂
已经有30人回复
7楼2012-12-28 19:14:00
2楼2012-12-22 16:05:29
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-12-24 18:57:57
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-12-24 18:57:57
|
有的比赤酵母是组氨酸缺陷型的，比如GS115，自身不能合成组氨酸，必须在培养基中补加组氨酸才能生长（天然培养基如YPD本身含组氨酸，不用添加，MM或MD就需要）。有的载体含HIS4基因，当转化后整合到酵母基因组后，his4基因可以合成组氨酸。因此，如果是含有His4基因的载体，就可以利用这个特点来筛选，转化后用不含组氨酸的平板，通常是MD平板来筛选重组子。 PGAPZaA载体是不含his4基因的，转化后筛选都是利用的上面的zeocin。有的人不想用zeocin（太贵了），就自己改构载体了，加一个his4基因。也可以将zeocin改成kanR基因，这样可以用G418来筛选。 方法很多，看自己怎么方便了。 |
3楼2012-12-22 19:09:35
4楼2012-12-24 10:04:29
