应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PGAPZA载体的使用
51/1返回列表
查看: 2045  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

761429495

新虫 (小有名气)

[交流] PGAPZA载体的使用

各位大侠们，我想用毕赤酵母来表达谷胱甘肽合成酶基因，选用PGAPZA表达载体，直接找酶切位点和目的片段连接就可以了吗，为什么有的文献上说要再这个载体上加His4啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-12-21 09:18:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopyzxx at 2012-12-22 19:09:35
有的比赤酵母是组氨酸缺陷型的，比如GS115，自身不能合成组氨酸，必须在培养基中补加组氨酸才能生长（天然培养基如YPD本身含组氨酸，不用添加，MM或MD就需要）。有的载体含HIS4基因，当转化后整合到酵母基因组后，h ...

哦哦 ，明白了 谢谢你哈
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-24 10:04:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

bonbonzd

木虫 (小有名气)
★
761429495(金币+1): 谢谢参与
是不是为了后续目的蛋白纯化分离，我也是不太懂，呵呵
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-22 16:05:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-12-24 18:57:57
有的比赤酵母是组氨酸缺陷型的，比如GS115，自身不能合成组氨酸，必须在培养基中补加组氨酸才能生长（天然培养基如YPD本身含组氨酸，不用添加，MM或MD就需要）。有的载体含HIS4基因，当转化后整合到酵母基因组后，his4基因可以合成组氨酸。因此，如果是含有His4基因的载体，就可以利用这个特点来筛选，转化后用不含组氨酸的平板，通常是MD平板来筛选重组子。
PGAPZaA载体是不含his4基因的，转化后筛选都是利用的上面的zeocin。有的人不想用zeocin（太贵了），就自己改构载体了，加一个his4基因。也可以将zeocin改成kanR基因，这样可以用G418来筛选。
方法很多，看自己怎么方便了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-22 19:09:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bonbonzd at 2012-12-22 16:05:29
是不是为了后续目的蛋白纯化分离，我也是不太懂，呵呵

呵呵，互相学习啊
回复此楼
5楼2012-12-24 10:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭