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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么？
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onkelhero

木虫 (小有名气)

[交流] 植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么？ 已有12人参与

植物细胞RNA提取用的研钵要高温灭菌么？ 感觉低温研磨后就加入Trizol了，中间没有RNase发挥作用的空间啊？
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1楼 2012-12-20 16:42:41
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drxiao2005

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by xudabin98 at 2012-12-21 15:59:46
你这个回复太果断，RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂，这个是不假，但是你要知道，抑制剂并不能够完全将所有的RNA酶全部抑制，肯定还会有一些会发挥作用的，酶动力学你应该好好看看。不知道你是否真的提取过RNA，提 ...

我不是果断，更不是武断。
我提棉花RAN，就是这么干的。
我觉得磨样的时候RNA酶的主要来源是植物组织，而不是研钵或者手或者唾沫星子。RNA提取后期的操作则是另一回事了。
我们实验室研钵是公用的。我的每次都把研钵在自来水中刷一刷，用吸水纸擦干，就开始磨样。
我这样干很多年了，在实验室被称为豪放派。
说来像是笑话。根据我的经验，初提植物RNA最大的问题在于材料过多。在考虑抑制RNA酶的时候，首先加少一点植物材料。
当然，我并不反对戴手套、处理研钵和不说话。我只是提供一点我的经验。毕竟植物材料易得，初提RNA时喜欢多加些材料，希望提高RNA产量。殊不知，结果是引入了更多的RNA酶和杂质。
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17楼2012-12-22 10:18:31
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我一般都会用DEPC水浸泡后，包上锡箔纸高温灭菌。做RNA多加小心为好。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-12-20 18:26:59
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Renavatio

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以在用之前用加点乙醇，烧一下再用
赞一下(1人) 回复此楼
Undefined！
3楼2012-12-21 00:33:54
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drxiao2005

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-12-22 19:02:32
根本不用。
植物组织中含有丰富的RNA酶。
在活细胞中，这些RNA酶一般不会大量降解RNA。
RNA提取液中一般含有RNA酶抑制剂。
所以应注意的地方是在RNA提取之后，特别是重悬在水溶液中后。
磨样的时候主要保证低温，别解冻。磨好后迅速转移到提取液中充分混匀。
不用处理研钵，也不用戴手套取样磨样。
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4楼2012-12-21 08:45:34
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