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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » Q-pcr熔解曲线
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)

[求助] Q-pcr熔解曲线

请问各位高手，我初做Q-pcr，跑的线，为什么呢一开始就上升呢。就是CT值2.5左右。还有熔解曲线有两个相近的峰。是不是DNA模板浓度太大了。。。
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1楼 2012-12-20 09:52:16
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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dongrh1981 at 2012-12-21 11:54:40
和上面的虫子意见一样：引物特异性不好，建议提高退火温度，最彻底的办法就是重新设计引物。
如果实在是不能换引物，那就尝试一些小花招：改变PCR buffer 的严谨性；换用热启动酶；或者荧光PCR反应时先走10个退火温 ...

好的，我试试你的绝招，谢谢
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11楼2012-12-21 12:16:24
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孙启亮

金虫 (著名写手)
不应该是模板的问题，整理下上图吧
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2楼2012-12-20 11:32:35
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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-12-20 11:32:35
不应该是模板的问题，整理下上图吧

好欢喜，在别的帖子上看过you。哈哈，好之后我把图传上
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3楼2012-12-20 12:33:46
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yanjiwuluo

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-12-20 11:32:35
不应该是模板的问题，整理下上图吧

看看我得扩增曲线，跟熔解曲线

1.png



2.png
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4楼2012-12-20 17:47:32
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