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清风寨

银虫 (小有名气)

[求助] 将两个基因串联到启动子下面,两个基因都能表达么?

想请问各位大侠,如果我将两个基因GFP、neo基因串联到A3启动子下游,两个基因都是完整的阅读框,中间用内切酶Not I酶切连接。下游再加上加尾信号和反向重复序列。这样子GFP和neo两个基因都能表达么?
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冷风过心变热
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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-20 12:12:45
是DNA上转录mRNA,上面有核糖体,形成葫芦串吧。如果随机的核糖体结合mRNA,那密码子岂不是很容易移位了?

基因一有TAA结尾,上的去一个H2O,这样前面的蛋白就释放出来了,后面ATG启动,是新的蛋白,两者不会连在一 ...

“上的去一个H2O”是什么意思??

我做的就是串联,按楼上的方式连接在PET-28A载体上的,三个 基因一起串联。每个基因TAA后直接与第二个基因的ATG无缝相连
表达的结果是每个基因独立表达

但是上次一个微生物方面的专家来单位提出意见,说TAA后就终止反应了,后面的基因么法表达的。
我找不到理论依据来解释反驳他,只能拿现成的结果来解释

还请各位多多赐教!
54楼2015-01-28 16:02:16
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hf2016

金虫 (正式写手)

理论上是中间没有终止子可以融合表达
一切开始于结束之后
2楼2012-12-20 08:53:54
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zhoufeng1982

木虫 (著名写手)

知道了啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊
3楼2012-12-20 08:57:59
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
清风寨: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-12-20 09:15:03
如果中间没有终止子的话是可以的。有终止密码子的话,两个基因可以串联表达。没有去掉了第一个基因的终止密码子的话形成融合蛋白。
4楼2012-12-20 09:10:02
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