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清风寨

银虫 (小有名气)

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专业: 细胞生物学研究中的新方法

[求助] 将两个基因串联到启动子下面，两个基因都能表达么？

想请问各位大侠，如果我将两个基因GFP、neo基因串联到A3启动子下游，两个基因都是完整的阅读框，中间用内切酶Not I酶切连接。下游再加上加尾信号和反向重复序列。这样子GFP和neo两个基因都能表达么？

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冷风过心变热

1楼2012-12-20 08:43:34

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charles08

铁杆木虫 (著名写手)

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引用回帖:

21楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-20 12:12:45
是DNA上转录mRNA,上面有核糖体，形成葫芦串吧。如果随机的核糖体结合mRNA,那密码子岂不是很容易移位了？

基因一有TAA结尾，上的去一个H2O，这样前面的蛋白就释放出来了，后面ATG启动，是新的蛋白，两者不会连在一 ...

“上的去一个H2O”是什么意思？？

我做的就是串联，按楼上的方式连接在PET-28A载体上的，三个基因一起串联。每个基因TAA后直接与第二个基因的ATG无缝相连
表达的结果是每个基因独立表达

但是上次一个微生物方面的专家来单位提出意见，说TAA后就终止反应了，后面的基因么法表达的。
我找不到理论依据来解释反驳他，只能拿现成的结果来解释

还请各位多多赐教！

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54楼2015-01-28 16:02:16

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清风寨

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