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sunxin2012

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[求助] 目的基因的导入

各位前辈，有哪位对转基因十分熟悉的，希望帮忙解决以下问题。
1、目的基因导入受体细胞，有必要带着完整的载体吗？可不可以在构建完整的表达载体之后，进行酶切，使其带有完整的表达框和部分载体进行转化，会不会影响以后的表达？
2、双基因表达载体的构建，能否给个大体步骤？
3、如果转化效率低，原因可能有哪些？

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1楼 2012-12-18 20:08:38

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

sunxin2012

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引用回帖:

13楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-20 09:06:56
如果想让外源基因稳定，最好整合到染色体上。质粒上必需有筛选压力才会存在，而且由于质粒的拷贝数不是很恒定，表达量也不稳定。如果整合到染色体上的话，应该是相对稳定的。整合后应该不容易断裂丢失。...

能不能再问你一问题，酶切后的末端不用做任何修饰吗？