应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒测序后发现有重叠现象
52/1返回列表
查看: 2490  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Cllair

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒测序后发现有重叠现象

之前将克隆的基因直接送测序一直说有重叠现象得不到测序结果。上次将转化后的大肠杆菌提取质粒送测序，结果还是有重叠现象。。。有点濒临崩溃的边缘，十分想请教各位虫友，大家有没有遇到过类似的情况，怎么解决的啊。
还有就是我想着直接送转化后的大肠杆菌去测序，之前查过资料说菌样测序的话结果可能不如质粒好。。。能给点相关的建议不？
回复此楼

» 猜你喜欢
有今生没来世，且行且珍惜。
1楼 2012-12-18 19:57:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by liguanying at 2012-12-19 18:50:22
如果用的通用引物测序，你向测序公司要一下，他们测序用的引物，然后和你的基因序列比对一下。看看是不是和你的基因序列有同源性。如果你用的是自己的基因引物测序，看一下你的引物是不是特异性不好。

我一直用自己的引物，我也觉得自己的引物特异性不够好，下次测序打算用通用引物。
赞一下 回复此楼
有今生没来世，且行且珍惜。
11楼2012-12-20 09:30:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果质粒没有提好会影响测序结果。首先确定一定要挑单克隆。有时候两个克隆靠在一起的不要用。筛到了阳性克隆，可以直接送菌液测序。
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-19 09:07:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuding6

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多换几个公司测试试
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-19 10:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Cllair

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-19 09:07:45
如果质粒没有提好会影响测序结果。首先确定一定要挑单克隆。有时候两个克隆靠在一起的不要用。筛到了阳性克隆，可以直接送菌液测序。

我这次把之前单克隆影印的菌落摇菌送测序的应该没问题吧？其实我一直都调单菌落的，这个基因自从在我师姐手里的时候就测序过很多次，一直因为重叠没有得到序列，我都开始怀疑这个基因本身有问题了。。。
赞一下 回复此楼
有今生没来世，且行且珍惜。
4楼2012-12-19 11:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭