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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双分子荧光诡异了，求赐教！
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luciferjoe

铜虫 (初入文坛)

[求助] 双分子荧光诡异了，求赐教！

做了个双分子荧光验证蛋白互作，用空载体做对照，结果两个空载体也发黄色荧光，还比连有互作蛋白基因的载体所发的黄色荧光更强。。。我用没注射过的叶片测了一下，没有黄色荧光。
不知道这是什么情况，求赐教！
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1楼 2012-12-17 11:48:33
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luciferjoe

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-17 15:30:25
启动子太strong，即使没有作用也会有荧光。用基因本身的启动子有时候太弱又看不到荧光。实验嘛就是这样。如果有可能最好用可以调控的启动子。

再请教一下，双分子荧光一般是不是不把N/C空载体作为对照啊？我看了几篇文献都没有提到，只是用单独N和C加目的片段做对照
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3楼2012-12-18 12:54:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
启动子太strong，即使没有作用也会有荧光。用基因本身的启动子有时候太弱又看不到荧光。实验嘛就是这样。如果有可能最好用可以调控的启动子。
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2楼2012-12-17 13:30:25
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by luciferjoe at 2012-12-18 12:54:02
再请教一下，双分子荧光一般是不是不把N/C空载体作为对照啊？我看了几篇文献都没有提到，只是用单独N和C加目的片段做对照...

当然是最好把两个空载体也做对照的，如果你可以控制好背景的话。当然用一个加目的片段的对照一般是比较漂亮的。
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4楼2012-12-18 13:40:46
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